《植物生理学报》 2019, 55(4): 493-502

过表达柠条锦鸡儿CkRNF185基因减弱拟南芥对渗透胁迫的耐受性

岳文冉¹, 王茜², 于秀敏³, 杨杞¹, 韩晓东¹, 王瑞刚¹, 李国婧^1,*

¹内蒙古农业大学生命科学学院, 内蒙古农业大学植物逆境生理与分子生物学自治区重点实验室, 呼和浩特010018; ²中国科学院遗传与发育生物学研究所, 北京100101; ³中国农业科学院草原研究所, 呼和浩特010018

通信作者：李国婧；E-mail: liguojing@imau.edu.cn

摘　要：

RING (really interesting new gene)型E3泛素连接酶在植物逆境胁迫和生长发育过程中起关键作用。本研究利用RACE技术从柠条锦鸡儿中克隆得到一个RING型E3泛素连接酶基因CkRNF185 (Caragana korshinskii RING-fnger 185), 其cDNA序列全长1 112 bp, 包含了696 bp的开放阅读框, 编码232个氨基酸。实时荧光定量PCR检测发现, CkRNF185基因的表达受NaCl和脱水处理的诱导。同时构建pCanG-CkRNF185过表达载体并转化野生型拟南芥, 得到转基因拟南芥过表达纯合体株系。通过对转基因拟南芥的研究, 发现在甘露醇处理条件下转CkRNF185植物植株变小且叶片提前变黄坏死, 叶绿素和脯氨酸含量皆降低。利用体外泛素化实验对CkRNF185进行检测发现该蛋白具有E3泛素连接酶活性。这些实验结果表明过表达E3泛素连接酶编码基因CkRNF185降低了拟南芥对渗透胁迫的耐受性。

关键词：E3泛素连接酶; 柠条锦鸡儿; CkRNF185; 渗透胁迫; 拟南芥

收稿：2018-11-13   修定：2019-03-21

资助：内蒙古自治区科技创新引导资金项目(KCBJ2018012)和呼和浩特市科技计划重大项目(2017-社-重-4)